AEEA-AEEA:n vesiliukoisuuden parantamismekanismi-

ADC:iden kohteena oleva myrkyllisyys{0}}on yksi tärkeimmistä niiden terapeuttista ikkunaa rajoittavista tekijöistä. Toksisuuden lähteitä ovat: hydrofobisten linkkereiden -hyötykuormien epäspesifinen sitoutuminen plasman proteiineihin, maksan sinimuotoisten endoteelisolujen otto ja retikuloendoteliaalijärjestelmän puhdistuma aggregaattien muodostumisen jälkeen. AEEA-AEEA parantaa merkittävästi vesiliukoisuutta, mikä vähentää kohteen myrkyllisyyttä useilla tasoilla.
Vesiliukoinen-muokkausmekanismi: AEEA-AEEA-runko sisältää neljä eetterihappiatomia ja kaksi amidisidosta. Eetterin happiatomit toimivat vahvoina vetysidoksen vastaanottajina, ja jokainen happi pystyy sitomaan 1-2 vesimolekyyliä; amidisidosten NH- ja C=O-ryhmät osallistuvat myös vetysidosverkostoon. Dynaamiset hydraatiolukumittaukset osoittavat, että yksi AEEA-AEEA-molekyyli voi sitoa noin 6-8 vesimolekyyliä vesiliuoksessa muodostaen vakaan hydraatiokerroksen. Tämä korkea nesteytys vähentää linkkeri-lääkkeen hyötykuorman logP-arvoa 1,5-2,0 yksiköllä (esim. MMAE-monAEEA:n logP on ~3,5, kun taas MMAE-AEEA-AEEA:n logP putoaa 1,8:aan). Samaan aikaan hydraatiokerroksen synnyttämä spatiaalinen hylkiminen estää tehokkaasti hydrofobista sitoutumista seerumin albumiiniin ja lipoproteiineihin.
Off-tavoite toksisuutta vähentävät vaikutukset: ① Vähentynyt maksan sisäänotto: Sinimuotoisten endoteelisolujen puhdistumareseptorit tunnistavat vähemmän hydrofiilisiä ADC:itä, mikä johtaa 50-70 %:n laskuun maksan jakautumisessa ja hepatotoksisuuden merkittävään lievitykseen (esim. kohonneet transaminaasit). ② Vähentynyt trombosytopenia: Hydrofobiset ADC:t ovat usein vuorovaikutuksessa verihiutaleiden kalvojen kanssa aiheuttaen immuuni-välitteisen verihiutaleiden tuhoutumisen. AEEA{10}}AEEA-modifikaatio vähentää verihiutaleiden sitoutumista 80 %. ③ Lievitetty perifeerinen neuropatia: Hydrofiilisten hyötykuormien on vaikea ylittää veri-hermoeste, mikä vähentää lääkkeiden kertymistä selkäjuuren hermosolmuihin. Eläintutkimuksissa AEEA-AEEA-linkkereitä sisältävät ADC:t saavuttivat suurimman siedetyn annoksen (MTD) nousun 10 mg/kg:sta 25 mg/kg:aan, mikä laajentaa terapeuttista ikkunaa 2,5-kertaiseksi. Tällä hetkellä useat kliinisen vaiheen ADC:t (esim. DS-8201-johdannaiset, SGN-35:n parannetut variantit) ovat omaksuneet tämän strategian.