AEEA-monomeerista dimeeriin

DAR (Drug to Antibody Ratio) on vasta-ainekonjugoitujen lääkkeiden (ADC) keskeinen laatuominaisuus, joka vaikuttaa suoraan tehoon ja toksisuuteen. Ihanteellinen DAR on yleensä 2-4, mutta monilla tehokkailla hyötykuormilla, kuten MMAE ja DM1, on vahva hydrofobisuus. Lyhytketjuisia tai yksittäisiä PEG-linkkereitä käytettäessä DAR, joka ylittää 4, johtaa kiihtyneeseen vasta-aineaggregaatioon ja -puhdistumaan. AEEA-AEEA:n käyttöönotto tarjoaa tehokkaan ratkaisun tähän ongelmaan.
Verrattuna yhteen AEEA-linkkeriin,AEEA-AEEAkaksinkertaistaa PEG-ketjun pituuden ja sillä on vahvempi hydrofiilisyys. Jokainen dimeeriyksikkö sisältää 4 eetterisidosta ja 2 amidisidosta, jotka voivat sitoa enemmän vesimolekyylejä ja muodostaa tiheämmän hydraatiokerroksen. Kun useita hydrofobisia lääkkeitä liitetään vasta-aineen pintaan AEEA-AEEA:n kautta, hydraatiokerros voi tehokkaasti suojata lääkkeiden välisiä hydrofobisia vuorovaikutuksia ja estää vasta-aineiden aggregaatiota. Kokeelliset tiedot osoittavat, että AEEA-AEEA:lla rakennetut ADC:t säilyttävät kolloidisen stabiilisuuden (aggregaationopeus<5%) even when DAR reaches 6-8, while the control using single AEEA shows significant precipitation when DAR>4.
DAR-sääntelystrategia viittaa AEEA-AEEA:n esilinkittämiseen lääkkeeseen paikkaohjatussa kytkentätekniikassa ja sen jälkeen reagoimiseen vasta-aineessa olevan muokatun kysteiinin kanssa. Säätämällä linkkerilääkeaineen ja vasta-aineen moolisuhdetta (yleensä 3:1 - 10:1), DAR-arvoa voidaan säätää tarkasti. Esimerkiksi 2--kertainen ylimäärä voi tuottaa DAR2-tuotteen, 4--kertainen ylimäärä voi tuottaa DAR4:n ja 8-kertainen ylimäärä voi saada aikaan DAR6-8-tuotteen. HIC-HPLC tai massaspektrometria voi määrittää tarkasti DAR:n jakautumisen. Korkeaa kuormitusta vaativiin kasvainindikaatioihin, kuten rintasyöpään, jossa on alhainen HER2-ekspressio ja pienisoluinen keuhkosyöpä, AEEA-AEEA mahdollistaa korkean DAR:n ja parantaa merkittävästi kasvainta tappavaa vaikutusta. Prekliiniset tutkimukset ovat osoittaneet, että DAR6:n ADC lisää kasvaimen estoa noin 40 % verrattuna DAR4:n ADC:hen samalla annoksella lisäämättä merkittävästi toksisuutta.